微生物培養基制備要求

微生物培養基制備要求

　　培養基配制的質量將直接影響微生物的生長。由于各種微生物的營養要求和培養目的不同，對各種培養基的制備要求如下:

　　1. 根據培養基配方的組成稱量，溶于蒸餾水中。使用前，應檢查所使用試劑和藥品的質量。

　　2. PH值測量和調整:PH值測量應在培養基冷至室溫時進行。由于熱、冷條件下pH值存在一定差異，測量完成后，按計算量加堿或酸并混合均勻，然后再次測試。培養基的pH值必須準確，否則可能影響微生物的生長或影響結果的觀察。但需要注意的是，高壓滅菌會影響某些培養基pH值的降低或升高，因此不建議滅菌壓力過高或次數過多，以免影響培養基質量。指示劑、脫氧膽酸鈉、瓊脂等一般在調整pH后加入。

　　3.培養基應保持清潔，以便觀察細菌生長情況。培養基加熱煮沸后，可用脫脂棉或絨布過濾去除沉淀物。如有必要，可用蛋清澄清。使用的瓊脂條在使用前應事先清洗和干燥，以避免因瓊脂中的雜質而影響透明度。

　　4. 鐵和銅等容器不能用來盛放培養基。最好使用水洗過的中性硬玻璃容器。

　　5. 培養基的殺菌不僅要達到完全殺菌的目的，還要注意不要因為加熱而降低其營養價值。一般121℃15分鐘就足夠了。如果培養基中含有不耐高溫的物質，如糖、血清、明膠等，應采用低溫殺菌或間歇法殺菌。一些不能加熱的試劑，如溴酸鉀、蛋黃、TTC、抗生素等，應在基礎瓊脂高壓殺菌后冷卻至50℃左右再加入。

　　6. 每批培養基配制完成后，應進行無菌生長試驗和被測菌株的生長試驗。如果是生化培養基，用標準菌株接種，觀察生化反應結果。反應應該正常。培養基不能存放太久。必要時可存放在4℃冰箱中。

　　7. 目前干培養基種類繁多，每批都需要一個標準菌株進行生長測試或生化反應觀察。各種培養基只有在相應的應變生長試驗良好后才能使用。新購買或儲存的干培養基在制備時還應測試pH值，并應按產品說明書中的劑量和方法使用。

　　8. 對配制的每一批培養基都應做好記錄，包括所用化學試劑、滅菌條件、菌株生長試驗結果、生產人員等，以備備查。