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定量菌株的使用方法是什么?進行試驗時要注意這些事情!

作者:樂診生物技術發布時間:2020-11-20 09:06:51瀏覽量:0
  在現在的生化行業中,對于定量菌株的使用是非常廣泛的,我們在使用它的時候不僅要保證使用正確的使用方法,還要保證進行試驗時要注意很多事情,比如樣品稀釋、試劑盒平衡、樣品和試劑的混勻、加樣、洗板、以及操作要點等等幾個方面。在文章中,小編就針對定量菌株的使用方法,以及使用它進行試驗時的注意事項這兩方面來給大家做一個詳細的介紹。
 

 

定量菌株的使用方法:

  1、用移液器或者注射器取定量定量菌株的稀釋液到裝凍干球的瓶子中。
 
  2、請將盛有定量菌株的瓶子放在漩渦混合器上混勻2分鐘,使其溶解充分。
 
  3、用移液器或者注冊器吸取定量菌株的定量菌液,一般為0.1ml左右。
 
  4、將0.1ml定量菌株的菌液均勻接種到待檢培養基。
 
  5、用玻璃棒將定量菌株的菌液均勻涂布在待檢培養基表面。
 
  6、晾干平皿,在恒溫環境中培養,一定時間后取出觀察計數。
 

 

使用定量菌株進行試驗時的注意事項:

  1、樣品稀釋
 
  一般定量菌株的樣品稀釋倍數均通過大量試驗確定,以保證試驗的靈敏度和特異性。酶聯免疫反應是一種敏感性很高的反應,如果血清不稀釋,不可避免會產生很強的非特異性反應,出現假陽性。
 
  2、試劑盒平衡
 
  定量菌株應在試驗前平衡至約25℃的室溫,一般需在室溫放置20-30分鐘以上。平衡時間太短會造成試劑混勻不夠,樣品孵育時間相對縮短,反應不夠充分。冬季室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘。
 
  3、樣品和試劑的混勻
 
  在對定量菌株稀釋前、后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗的均一性。
 
  4、加樣
 
  加樣是一項很重要的步驟。加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產生氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區,易導致非特異吸附。
 
  5、洗板
 
  固相免疫測定技術是一種非均相免疫測定技術,需以洗滌操作將特異結合于固相的抗原或抗體與反應溫育過程中吸附的非特異成份分離開來,以保證定量菌株測定的特異性。
 
  6、操作要點
 
  定量菌株洗液盡量不要溢出孔外;加洗液后要靜置1分鐘,甩去板孔中洗液后,一定要大力拍干;及時更換吸水紙,尤其是拍過酶標記物的吸水紙一定要棄去,否則可能影響試驗結果。
 

 
  綜上所述,在看完文章之后,相信大家對于定量菌株的相關知識一定更了解了,如果大家想要了解更多的話,可以隨時來咨詢我們!

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