
EC培養基配制
1)成份
胰蛋白胨或示胨 20.0g
乳糖 5.0g
膽鹽混合物或3號膽鹽 1.5g
磷酸氫二鉀(K2HPO4·3H2O) 4.0g
磷酸二氫鉀(KH2PO4) 1.5g
氯化鈉(NaCl) 5.0g
蒸餾水 1000mL
2)制法
將上述成份加熱溶解,分裝于內裝倒管的試管中,同上滅菌后pH值應為6.9。此培養基用前不宜置入冰箱,以防檢測時出現假陽性。
B.3.1.3 檢驗步驟
a) 初發酵試驗
1) 生物樣品在無菌操作條件下取全組織樣放入無菌玻璃研缽中研磨,研磨后用特殊加工的大口移液管無菌移取1.0克樣品至9.0毫升無菌海水的試管中,制備成10-1稀釋樣。 然后,用一系列裝有9.0毫升無菌海水的試管連續稀釋,制備成10-2、10-3、10-4稀釋樣。
2) 吸取上述10-1 、10-2、10-3稀釋樣,每個稀釋度各取1mL稀釋樣5份,分別加入5支盛有10mL已滅菌的普通濃度乳糖蛋白胨培養液的試管中(內有倒管)。
3) 將上述15支試管充分混勻后,置于44℃恒溫箱中培養24h。
b) 復發酵試驗
經培養24h后,將產酸(培養液變成黃色)產氣(倒管上端積有氣泡)及只產酸的發酵管,用一無菌環(3mm直徑)或木壓舌板轉接入EC培養液中,搖勻后置44±0.5℃恒溫箱中培養24±2h。在此期間內所得的產氣陽性管即證實有糞大腸菌群存在。
依據陽性管數查對照表B.1,即可得每g生物樣中糞大腸菌群的最近似值(MPN)。
若海生物樣污染較嚴重,接種后15管全部產酸產氣時,可將接種量減少為十分之一,即1mL的5管,0.1mL(1-9稀釋的1mL)5管,0.01mL(1+99稀釋的1mL)的5管。此時,由表B.1查得的每1/10g生物樣中的大腸菌群數。


