其實辦法很簡單的,培養基就按目標菌來配(需要什么細菌就配對應的培養基),滅菌后以無菌操作把細菌接種進去,然后在滴加無菌石蠟油,高度為1cm,這樣石蠟油浮在培養基表面,把空氣隔絕，這樣就讓培養基里成為無氧的條件了.
最典型的實驗是O/F試驗,用來判斷細菌是需氧型還是無氧發酵型
不過特別說明的是,絕大多數厭氧培養的細菌并不需要絕對的無氧,只需要氧氣少到一定程度就可以了,比如腦膜炎奈瑟菌、空腸彎曲菌、結核桿菌、產氣莢膜梭菌，部分細菌對二氧化碳也有要求，比如腦膜炎奈瑟菌
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