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血清培養基的基本配方

作者:樂診生物技術發布時間:2021-08-04 17:10:07瀏覽量:0

1、細菌培養基

配方一 牛肉膏瓊脂培養基

牛肉膏0.3克 ,蛋白胨1.0克,氯化鈉 0.5克,瓊脂 1.5克,水 100毫升

在燒杯內加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化鈉,用蠟筆在燒杯外作上記號后,放在火上加熱。待燒杯內各組分溶解后,加入瓊脂,不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解后補足失水,用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調整pH值到7.2~7.6,分裝在各個試管里,加棉花塞,用高壓蒸汽滅菌30分鐘。

配方二 馬鈴薯培養基

取新鮮牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀細細剁成肉末后,加入500毫升蒸餾水和5克蛋白胨。在燒杯上做好記號,煮沸,轉用文火燉2小時。過濾,濾出的肉末干燥處理,濾液pH值調到7.5左右。每支試管內加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心,滅菌,備用。

配方三 根瘤菌培養基

葡萄糖 10克 磷酸氫二鉀 0.5克

碳酸鈣 3克 硫酸鎂 0.2克

酵母粉 0.4克 瓊脂 20克

水 1000毫升 1%結晶紫溶液 1毫升

先把瓊脂加水煮沸溶解,然后分別加入其他組分,攪拌使溶解后,分裝,滅菌,備用。

2、放線菌培養基

配方一 淀粉瓊脂培養基(高氏培養基)

可溶性淀粉 2克 硝酸鉀 0.1克

磷酸氫二鉀 0.05克 氯化鈉 0.05克

硫酸鎂 0.05克 硫酸亞鐵 0.001克

瓊脂 2克 水 100毫升

先把淀粉放在燒杯里,用5毫升水調成糊狀后,倒入95毫升水,攪勻后加入其他藥品,使它溶解。在燒杯外做好記號,加熱到煮沸時加入瓊脂,不停攪拌,待瓊脂完全溶解后,補足失水。調整pH值到7.2~7.4,分裝后滅菌,備用。

配方二 面粉瓊脂培養基

面粉 60克 瓊脂 20克

水 1000毫升

把面粉用水調成糊狀,加水到500毫升,放在文火上煮30分鐘。另取500毫升水,放入瓊脂,加熱煮沸到溶解后,把兩液調勻,補充水分,調整pH值到7.4,分裝,滅菌,備用。

3、真菌培養基

配方一 薩市(Sabouraud’s)培養基

蛋白胨 10克 瓊脂 20克

麥芽糖 40克 水 1000毫升

先把蛋白胨、瓊脂加水后,加熱,不斷攪拌,待瓊脂溶解后,加入40克麥芽糖(或葡萄糖),攪拌,使它溶解,然后分裝,滅菌,備用。

本培養菌是培養許多種類真菌所常用的。

配方二 馬鈴薯糖瓊脂培養基

把馬鈴薯洗凈去皮,取200克切成小塊,加水1000毫升,煮沸半小時后,補足水分。在濾液中加入10克瓊脂,煮沸溶解后加糖20克(用于培養霉菌的加入蔗糖,用于培養酵母菌的加入葡萄糖),補足水分,分裝,滅菌,備用。

把這培養基的pH值調到7.2~7.4,配方中的糖,如用葡萄糖還可用來培養放線菌和芽孢桿菌。

配方三 黃豆芽汁培養基

黃豆芽 100克 瓊脂 15克

葡萄糖 20克 水 1000毫升

洗凈黃豆芽,加水煮沸30分鐘。用紗布過濾,濾液中加入瓊脂,加熱溶解后放入糖,攪拌使它溶解,補足水分到1000毫升,分裝,滅菌,備用。

把這培養基的pH值調到7.2~7.4,可用來培養細菌和放線菌。

配方四 豌豆瓊脂培養基

豌豆 80粒 瓊脂 5克

水 200毫升

取80粒干豌豆加水,煮沸1小時,用紗布過濾后,在濾液中加入瓊脂,煮沸到溶解,分裝,滅菌,備用。

4、食用菌菌種培養基

配方一 馬鈴薯—蔗糖--瓊脂培養基

20%馬鈴薯煮汁 1000毫升

蔗糖 20克 瓊脂 18克

把馬鈴薯洗凈去皮后,切成小塊。稱取馬鈴薯小塊200克,加水1000毫升,煮沸20分鐘后,過濾。在濾汁中補足水分到1000毫升,即成20%馬鈴薯煮汁。在馬鈴薯煮汁中加入瓊脂和蔗糖,煮沸,使它溶解后,補足水分,分裝,滅菌,備用。使用該培養基對pH值要求不嚴格,可以不測定。

配方二 綜合馬鈴薯培養基

20%馬鈴薯煮汁 1000 毫升

磷酸二氫鉀 3克 硫酸鎂 1.5克

葡萄糖 20克 維生素 10毫克

瓊脂 18克

先配制20%馬鈴薯煮汁,方法同上。在煮汁中加入上述各種組分,加熱溶解后補足水分,調整pH值到6。分裝,滅菌,備用。 該培養基用于培養和保存靈芝、平菇、香菇等食用菌菌種。

5.煙草的培養基

在植物組織培養時,通過調節IAA和CTK的比值能影響愈傷組織分化出根或芽.CTK/IAA高時,愈傷組織分化芽

CTK/IAA低時,分化根;CTK/IAA比例適中維持愈傷組織不分化

愈傷組織誘導培養基制備

以MS培養基母液為基礎,向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,鐵鹽100×母液20mL ,維生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培養基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL.然后加入實際配制培養基體積約2/3-3/4的蒸餾水,加入40g蔗糖后攪拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調整pH值至5.8-6.0.加入14g瓊脂,將鋁鍋置于電爐上,攪拌加熱使瓊脂完全溶化,然后用蒸餾水定容至終體積2L,繼續加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中.

 

真菌培養基

配方一 薩市(Sabouraud’s)培養基

蛋白胨 10克 瓊脂 20克

麥芽糖 40克 水 1000毫升

先把蛋白胨、瓊脂加水后,加熱,不斷攪拌,待瓊脂溶解后,加入40克麥芽糖(或葡萄糖),攪拌,使它溶解,然后分裝,滅菌,備用。

本培養菌是培養許多種類真菌所常用的。

配方二 馬鈴薯糖瓊脂培養基

把馬鈴薯洗凈去皮,取200克切成小塊,加水1000毫升,煮沸半小時后,補足水分。在濾液中加入10克瓊脂,煮沸溶解后加糖20克(用于培養霉菌的加入蔗糖,用于培養酵母菌的加入葡萄糖),補足水分,分裝,滅菌,備用。

把這培養基的pH值調到7.2~7.4,配方中的糖,如用葡萄糖還可用來培養放線菌和芽孢桿菌。

配方三 黃豆芽汁培養基

黃豆芽 100克 瓊脂 15克

葡萄糖 20克 水 1000毫升

洗凈黃豆芽,加水煮沸30分鐘。用紗布過濾,濾液中加入瓊脂,加熱溶解后放入糖,攪拌使它溶解,補足水分到1000毫升,分裝,滅菌,備用。

把這培養基的pH值調到7.2~7.4,可用來培養細菌和放線菌。

配方四 豌豆瓊脂培養基

豌豆 80粒 瓊脂 5克

水 200毫升

取80粒干豌豆加水,煮沸1小時,用紗布過濾后,在濾液中加入瓊脂,煮沸到溶解,分裝,滅菌,備用。

大腸桿菌

LB液體培養基:1%蛋白胨,0.5%酵母提取物,1% NaCl

LB固體培養基:1%蛋白胨,0.5%酵母提取物,1% NaCl,1.5%瓊脂粉

酵母菌

YPD液體培養基:2%蛋白胨,1%酵母提取物,2%葡萄糖

YPD固體培養基:2%蛋白胨,1%酵母提取物,2%葡萄糖,1.5%瓊脂粉

BMGY/BMMY:2%蛋白胨,1%酵母提取物,100 mM磷酸鉀緩沖液(pH6.0),1.34% YNB,4×10-5 生物素,1%甘油/0.5%甲醇。

碳源、氮源、水、無機鹽、生長因子。碳源、氮源要針對菌種及其他因素確定比例;生長因子是些微量但不可少的物質,包括氨基、核苷酸、磷酸、維生素等。

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